流式細(xì)胞儀的常見(jiàn)問(wèn)題有哪些？

流式細(xì)胞儀(flowcytometry，F(xiàn)CM)作為一種強(qiáng)大的單細(xì)胞分析工具，可以對(duì)于處在快速直線流動(dòng)狀態(tài)中的細(xì)胞或生物顆粒同時(shí)進(jìn)行多參數(shù)、快速定量分析和分選的高新技術(shù)。那么流式細(xì)胞儀的常見(jiàn)問(wèn)題有哪些呢？讓我們一起來(lái)看看吧！一、抗體孵育時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果嗎？通常情況下，標(biāo)記細(xì)胞表面抗原的熒光抗體需要在室溫孵育20-30分鐘。對(duì)于一些狀態(tài)較脆弱的細(xì)胞（例如從組織中分離、培養(yǎng)的免疫細(xì)胞），切勿過(guò)長(zhǎng)時(shí)間孵育，同時(shí)建議使用染色緩沖液（StainingBuffer），其中主要成分為...

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流式細(xì)胞術(shù)的應(yīng)用有什么？

流式細(xì)胞術(shù)（FCM）是一種對(duì)處在快速流動(dòng)中的細(xì)胞或其它生物微粒逐個(gè)進(jìn)行多參數(shù)的快速定量分析和分選的技術(shù)。它集計(jì)算機(jī)技術(shù)、激光技術(shù)、流體力學(xué)、熒光標(biāo)記技術(shù)、單克隆抗體技術(shù)、細(xì)胞免疫學(xué)于一體，按照細(xì)胞或生物顆粒的物理或化學(xué)性質(zhì)，同時(shí)具有分析和分選細(xì)胞或生物顆粒的功能。那么你知道流式細(xì)胞術(shù)的應(yīng)用有什么嗎？讓我們一起來(lái)看看吧！一、流式細(xì)胞術(shù)科研應(yīng)用1.細(xì)胞凋亡檢測(cè)在正常細(xì)胞中，細(xì)胞膜上的磷脂酰絲氨酸（PS）位于胞漿側(cè)。細(xì)胞凋亡中期，PS外翻。AnnexinV是一種Ca2+依賴的對(duì)PS...

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Alzet滲透泵技術(shù)手冊(cè)

一、Alzet滲透泵介紹Alzet滲透泵小巧，可植入大、小鼠，及其他實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體內(nèi)。這些可灌流的植入式膠囊滲透泵可以一定的釋放速率連續(xù)的釋放藥物、荷爾蒙及其他各種藥劑，可控制在一天到六周的期間，不需要連接任何外接的裝置及做其他的處理，因而可以免去在夜間或周末還要去投放劑量。Alzet滲透泵可被植入在皮下或腹腔內(nèi)，用在全身性服藥的反應(yīng)。它們可被接上導(dǎo)管而輸出到靜脈或動(dòng)脈內(nèi)。或者，它們可接導(dǎo)管，被用在給予到特定的標(biāo)的物上，讓藥物或藥劑的反應(yīng)可發(fā)生在局部的組織或器官上。這些植入式膠囊...

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核酸電泳實(shí)驗(yàn)問(wèn)題有哪些？如何解決？

你知道核酸電泳實(shí)驗(yàn)問(wèn)題有哪些嗎？該如何解決呢？讓我們一起來(lái)看看吧！一、無(wú)條帶或幾乎看不到條帶原因：1.上樣染料掩蓋目標(biāo)條帶；2.凝膠超限運(yùn)行；3.電極反接；4.染色敏感度低；5.光源錯(cuò)誤。解決方法：1.檢查電泳中使用的加載染料的表觀遷移大小。因?yàn)槿玖峡赡軙?huì)掩蓋和隱藏目標(biāo)條帶，特別是在樣品量低的情況下。2.監(jiān)測(cè)加載染料的運(yùn)行時(shí)間和遷移，以避免將較小的樣品分子從凝膠上運(yùn)走。3.確保將電極正確連接至電源。設(shè)置水平凝膠時(shí)，凝膠孔應(yīng)與負(fù)極位于同一側(cè)。4.檢查制造商提供的用于檢測(cè)核酸的熒...

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qPCR曲線常見(jiàn)問(wèn)題有哪些？如何解決？

在qPCR實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，經(jīng)常會(huì)遇到異常擴(kuò)增曲線和熔解曲線的困擾，那么qPCR曲線常見(jiàn)問(wèn)題有哪些呢？該如何解決呢？讓我們一起來(lái)看看吧！一、擴(kuò)增曲線相關(guān)問(wèn)題1.無(wú)擴(kuò)增曲線可能原因：（1）沒(méi)有打開(kāi)熒光信號(hào)采集。檢查程序設(shè)置，三步法擴(kuò)增程序在72℃延伸階段采集信號(hào)，兩步法擴(kuò)增程序的信號(hào)采集設(shè)置在退火延伸步驟。（2）引物降解。可通過(guò)PAGE電泳檢驗(yàn)引物的完整性。（3）模板濃度低。建議增加模板投入量或重新制備較高濃度模板。2.擴(kuò)增曲線不光滑可能原因：（1）儀器長(zhǎng)時(shí)間未校準(zhǔn)，在檢測(cè)中出現(xiàn)了波...

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