ELISA檢測方法有哪些？

根據(jù)試劑的來源和標本的性狀及檢測的具備條件的不同，所使用的檢測方法也不同，那么ELISA檢測方法有哪些呢？讓我們一起來看看吧！

一、雙抗體夾心法測抗原

雙抗體夾心法是將特異性抗體結(jié)合到固相載體上形成固相抗體，然后和待測血清中的響應(yīng)抗原結(jié)合形成免疫復(fù)合物，洗滌后加酶標記抗體，與免疫復(fù)合物中的抗原結(jié)合形成酶標抗體-抗原-固相抗體復(fù)合物，加底物顯色，判斷抗原的含量。

二、競爭法

首先將特異性抗體包被于固相載體表面，經(jīng)洗滌后分成兩組：一組加酶標記抗原和被測抗原的混合液，另一組只加酶標記抗原，經(jīng)孵育洗滌后加底物顯色，這兩組底物降解量之差，即為所要測定的未知抗原的量。此方法測定的抗原只要有一個結(jié)合部位即可，對小分子抗原如激素和藥物類的測定常用此法。

三、直接法

在直接Elisa中，抗原通過被動吸附直接固定在板的表面，并使用HRP標記的一抗進行檢測。將無色底物引入樣品，該底物與酶結(jié)合物反應(yīng)，并產(chǎn)生可測量的副產(chǎn)物。根據(jù)底物的選擇，該副產(chǎn)物可以是比色的，化學(xué)發(fā)光的或熒光的。信號產(chǎn)生的大小與樣品中抗原的數(shù)量成正比。

四、間接法

間接Elisa本質(zhì)上是直接ELISA的修改版本。在間接ELISA中，用于檢測抗原的一抗是未偶聯(lián)的。取而代之的是，對一抗的宿主物種具有反應(yīng)性的酶標二級抗體被用于檢測一抗-抗原復(fù)合物（間接檢測抗原）。將無色底物引入樣品，該底物與酶結(jié)合物反應(yīng)，并產(chǎn)生可測量的副產(chǎn)物。根據(jù)底物的選擇，該副產(chǎn)物可以是比色的，化學(xué)發(fā)光的或熒光的。信號產(chǎn)生的大小與樣品中抗原的數(shù)量成正比。與直接ELISA相比，使用輔助檢測試劑具有明顯的優(yōu)勢，即信號放大。

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