MLPA試驗(yàn)步驟

在上篇MLPA試驗(yàn)原理中，我們已經(jīng)詳細(xì)介紹了MLPA技術(shù)。MLPA，即多重連接探針擴(kuò)增技術(shù)，是一種分子生物學(xué)技術(shù)，用于檢測(cè)基因的拷貝數(shù)變異和序列變異。它結(jié)合了PCR（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）和連接酶技術(shù)，通過設(shè)計(jì)特定的探針來(lái)識(shí)別和擴(kuò)增目標(biāo)DNA序列。下面讓我們一起來(lái)看看MLPA的試驗(yàn)步驟吧！MLPA試驗(yàn)步驟分為六步：變性、雜交、連接、PCR擴(kuò)增、片段分離、數(shù)據(jù)分析。一、變性將DNA標(biāo)本放入PCR儀中加熱5分鐘，使DNA雙鏈解鏈成單鏈。純化的樣本DNA被變性。二、雜交加入雜交反應(yīng)液。雜...

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MLPA試驗(yàn)原理

MLPA技術(shù)，即多重連接探針擴(kuò)增技術(shù)，于2002年首先報(bào)道，是近幾年發(fā)展起來(lái)的一種針對(duì)待檢DNA序列進(jìn)行定性和半定量分析的新技術(shù)。該技術(shù)高效、特異，在一次反應(yīng)中可以檢測(cè)45個(gè)核苷酸序列拷貝數(shù)的改變，已經(jīng)應(yīng)用于多個(gè)領(lǐng)域、多種疾病的研究。下面讓我們一起來(lái)看看MLPA技術(shù)的試驗(yàn)原理吧！在MLPA實(shí)驗(yàn)中，純化的樣本DNA被變性。之后用MLPA探針寡核苷酸孵育過夜。每個(gè)MLPA探針都具有針對(duì)特定基因組序列的探針。每對(duì)MLPA探針包括兩條單鏈DNA:左側(cè)探針和右側(cè)探針寡核苷酸。簡(jiǎn)稱分別是...

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非預(yù)染蛋白Marker和預(yù)染蛋白Marker的區(qū)別

蛋白Marker被稱為蛋白質(zhì)質(zhì)量標(biāo)定劑，是一種由已知分子質(zhì)量的蛋白質(zhì)混合物構(gòu)成的，類似于"尺寸"的工具，用于指示蛋白質(zhì)條帶的大小。下面讓我們一起來(lái)看看非預(yù)染蛋白Marker和預(yù)染蛋白Marker的區(qū)別吧！非預(yù)染蛋白Marker：是幾種已知分子量并純化好的蛋白質(zhì)預(yù)混液，方便不同大小的蛋白比較。非預(yù)染的Marker使用上不如預(yù)染Marker好用，因?yàn)殡娪具^程中看不到，電泳結(jié)束后經(jīng)過蛋白染色后才能起指示作用，無(wú)法在實(shí)驗(yàn)過程中起預(yù)示參照作用，屬于“后知后覺”型的。但是由于蛋白沒有附帶...

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常見緩沖液有什么

常見緩沖液有什么實(shí)驗(yàn)室中常常使用的各類溶液種類繁多，且配制方法五花八門，是否挑花眼了呢?本文總結(jié)了近三十種常用溶液、緩沖液、培養(yǎng)基的配制方法，涵蓋了分子生物學(xué)、蛋白分析、細(xì)胞培養(yǎng)、微生物培養(yǎng)等各個(gè)領(lǐng)域。下面讓我們一起來(lái)看看常見緩沖液有什么吧！一、蛋白電泳緩沖液蛋白電泳緩沖液種類非常之多，需要根據(jù)凝膠體系來(lái)進(jìn)行選擇。凝膠系統(tǒng)為Tris-甘氨酸體系時(shí)，可選擇Tris-甘氨酸電泳緩沖液，凝膠系統(tǒng)為Bis-Tris體系時(shí)，可選擇MES或MOPS緩沖液，當(dāng)凝膠系統(tǒng)為Tris-trici...

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DNA的提取方法

DNA的提取方法DNA的提取可以簡(jiǎn)單的分為裂解和純化兩大步驟，裂解是破壞樣品細(xì)胞結(jié)構(gòu)，從而使樣品中的DNA游離在裂解體系中的過程，純化則是使DNA與裂解體系中的其它成分，如蛋白質(zhì)、鹽及其它雜質(zhì)徹d分離的過程。下面讓我們一起來(lái)看看DNA的提取方法都有什么吧！一、高鹽沉淀法高鹽沉淀法是酚氯仿抽提方法的一種變體，它簡(jiǎn)化了酚氯仿抽提的繁瑣操作，并克服了其缺點(diǎn)，只是得到的DNA純度不夠穩(wěn)定。二、酚氯仿抽提法酚氯仿抽提是一種有效的蛋白質(zhì)去除方法，但如果裂解體系中的蛋白質(zhì)含量超過了其飽和度...

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