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標題:反轉錄和逆轉錄的區別一、反轉錄(ReverseTranscription)1.定義:以RNA為模板合成DNA的過程,逆轉中心法則方向(RNA→DNA)。2.核心要素:3.催化酶:反轉錄酶(ReverseTranscriptase,RTase)4.常見來源:逆轉錄病毒(如HIV)、嗜肝DNA病毒、端粒酶5.反應本質:RNA指導的DNA合成6.分子生物學實驗:RT-PCR:提取RNA→反轉錄為cDNA→PCR擴增目標基因cDNA文庫構建:將mRNA逆轉錄為雙鏈DNA并克隆7...
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標題:T細胞激活磁珠指南:高效擴增/免疫治療核心工具|技術解析+選型攻略一、T細胞激活磁珠:免疫細胞治療革命的“發動機”在CAR-T療法、腫瘤免疫治療、疫苗開發等領域,T細胞的高效激活與擴增是成功的關鍵。傳統抗體刺激法存在激活效率低、細胞因子風暴風險高、操作繁瑣等痛點。解決方案:T細胞激活磁珠——通過超順磁性微球偶聯CD3/CD28抗體,模擬體內抗原遞呈,實現:95%T細胞活化率(遠超板包被法)擴增倍數提升5-10倍精準控制激活強度,降低細胞因子釋放綜合征(CRS)風險二、核...
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質粒提取濃度低?6大核心原因+解決方案+避坑指南的知識干貨,分享給每位同學~一、質粒濃度低直接后果:實驗全線崩潰!當質粒濃度<50ng/μL時:1.轉化失敗率↑300%2.測序信號弱(峰圖碎裂)3.酶切/連接效率暴跌立即排查以下6大關鍵環節!二、質粒濃度低的6大核心原因+破解方案原因1:菌體量不足(占比~35%)錯誤操作:?OD???<0.6收菌→菌數太少?離心轉速<6000g→菌體丟失解決方案:收菌標準:OD???=0.8-1.0(對數生長期)離心參數:≥12,000g×2...
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在生命科學研究和臨床診斷領域,精準、高效地分離特定類型的細胞至關重要。磁性細胞分選技術(MagneticCellSorting,MACS)因其操作簡便、快速、溫和且分選純度高等優點,已成為主流的細胞分離方法之一。而在這項技術的核心,扮演著“幕后功臣”角色的,正是細胞分選磁極。一、什么是細胞分選磁極?細胞分選磁極,簡稱為磁極或磁分離柱/架,是磁性細胞分選系統中產生高強度、高梯度磁場的關鍵物理部件。它通常由特殊的永磁體材料(如釹鐵硼)或電磁體構成,并設計成特定的形狀(如圓柱形、方...
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