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各種轉染試劑中文說明一、PEIPrimePowder,TransfectionGradeLinearPolyethylenimine(Serochem)轉染步驟(以HEK293貼壁細胞為例)1.細胞接種:細胞密度2-6x106cells/mL.2.質粒的準備:在5%最終培養體積的DMEM或培養基中,每106個細胞稀釋1.0ugpDNA。3.PEI的準備:在5%最終培養體積的DMEM或培養基中,每106個細胞稀釋3.0ugPEIPrime,混勻通過快速,短暫渦旋或顛倒數次試管,...
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1冷凍管應如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37C水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1分鐘內全部融化,并注意水面不可超過冷凍管蓋沿,否則易發生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時,必須注意安全,預防冷凍管之爆裂。2細胞冷凍管解凍培養時,是否應馬上去除DMSO?除少數特別注明對DMSO敏感之細胞外,絕大部分細胞株(包括懸浮性細胞),在解凍之后,應直接放入含有10-15ml新鮮培養基之培養角瓶中,待隔天再置換新鮮培養基以去除DMSO即可,如此可避免大部分解凍后細胞無法生長或貼附之...
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RNA提取試劑盒用于從細胞、組織、新鮮血液和病毒中提取200bp及以下的smallRNA,用LB10裂解樣品后,加入氯仿,溶液分為無色水相和粉紅色有機相,RNA在水相中;用RNA硅膠膜離心柱特異地吸附水相中的大分子量RNA(28SrRNA,18SrRNA,mRNA),流出液中的smallRNA用miRNA硅膠膜離心柱特異地吸附。與其它miRNA提取方法相比,該試劑盒裂解能力強、提取量高、專一性強,應用范圍廣。RNA提取試劑盒的提取步驟:1、將處理后的樣品在室溫靜置5~10分鐘...
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CST抗體的制備工藝:根據CST抗體制備的原理和方法,主要分為單克隆抗體、多克隆抗體和基因工程抗體三大類。早期傳統的抗體制備方法是將抗原經各種途徑免疫動物,由于抗原物質具有多種抗原決定簇,故可刺激產生多種抗各種決定簇的抗體,形成細胞克隆,合成和分泌抗體到血清或體液中,故在其血清中實際上是含多種抗體的混合物,這種用體內免疫法所獲得的免疫血清為多克隆抗體(polclonalantibody,Pab),也是第一代抗體。由于這種抗體是不均一的,無論是對抗體分子結構與功能的研究或是臨床...
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