Elisa試劑盒檢測(cè)原理

Elisa生物檢測(cè)是一種敏感度高，同時(shí)特異性強(qiáng)，重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)檢測(cè)方法，由于其試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡(jiǎn)便，結(jié)果判斷較客觀等因素，已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中。

目前市面上的Elisa試劑盒檢測(cè)原理主要有以下四種：直接法，間接法，夾心法，競(jìng)爭(zhēng)法。

Elisa試劑盒評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)：

① 準(zhǔn)確性：標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值，應(yīng)大于等于0.9900。

② 靈敏度：反應(yīng)試劑盒的檢測(cè)濃度最小值

③ 特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類(lèi)似物交叉反應(yīng)。

④ 重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)

⑤ 回收率：判斷實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和特異性

Elisa試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)曲線：

標(biāo)曲R值是幾個(gè)9才合格？

實(shí)驗(yàn)室應(yīng)按檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)（方法）的要求使用標(biāo)準(zhǔn)溶液或標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。所用標(biāo)準(zhǔn)溶液或標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)應(yīng)覆蓋被測(cè)樣品的濃度范圍。檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)（方法）如無(wú)具體的要求，至少使用5個(gè)標(biāo)樣（除空白外）建立線性標(biāo)準(zhǔn)曲線，每個(gè)點(diǎn)重復(fù)測(cè)定1-3次，對(duì)于篩選方法，線性回歸方程的相關(guān)系數(shù)不應(yīng)低于0.98，對(duì)于確證方法，相關(guān)系數(shù)不應(yīng)低于0.99。

其實(shí)，大于0.99是判斷是否為線性相關(guān)的一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)，實(shí)際應(yīng)用中線性大于0.999才是比較理想的。線性在0.99到0.999之間的監(jiān)測(cè)結(jié)果只用接近最高濃度一半（中間濃度）的位置才比較準(zhǔn)確，如果線性大于0.999的話，在整個(gè)線性范圍內(nèi)都會(huì)有一個(gè)比較滿意的結(jié)果。

如果檢測(cè)的線性不好，可以減少標(biāo)準(zhǔn)的覆蓋范圍，將標(biāo)準(zhǔn)的濃度調(diào)整到待測(cè)樣品濃度附近，這樣結(jié)果也是非常準(zhǔn)確的。例如，樣品的濃度約20ppb,但在0~50ppb范圍建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，但線性非常不理想，這時(shí)可以將標(biāo)準(zhǔn)范圍調(diào)整到15~25ppb之間，作五個(gè)標(biāo)準(zhǔn)。

可以檢測(cè)檢測(cè)各類(lèi)食品，飼料，組織及生物液體中真菌毒素、抗生素、食品添加劑以及其他細(xì)菌蛋白的ELISA試劑盒：

1.抗生素類(lèi)：氨芐青霉素，貨號(hào)：E4350，樣本：血清，尿液，牛奶，組織

檢測(cè)食品中抗生素的殘留

樣本類(lèi)型：組織、血清、牛奶、雞蛋和其他生物樣本

真菌毒素是真菌產(chǎn)生的低分子量次級(jí)代謝產(chǎn)物

2.真菌毒素：總黃曲霉毒素，貨號(hào)：E4747，樣本：酒、醬油、醋、谷物、花生、配方飼料、食用油

樣品類(lèi)型：玉米、谷物、花生、大米、大豆等。

食品受到生物和環(huán)境污染物的污染發(fā)生在生產(chǎn)和加工的幾個(gè)階段

3.食品添加劑： 沙丁胺醇，貨號(hào)：K4209，樣本：豬尿、組織、飼料

樣品類(lèi)型：牛奶、肉類(lèi)、玉米、谷物、花生、大米、大豆，等。

表達(dá)蛋白經(jīng)過(guò)幾個(gè)純化步驟后，宿主細(xì)胞蛋白仍然可以以較高濃度存在，甚至?xí)c原料藥一起純化和濃縮；樣品類(lèi)型：細(xì)胞裂解液、其他生物液

4.宿主細(xì)胞蛋白：CHO 宿主細(xì)胞蛋白，貨號(hào)：E4537，樣本：細(xì)胞裂解液，其他生物液體

5.其他毒素：雙酚A（BPA），E4722，樣本：細(xì)胞裂解液，其他生物液體